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生命金春肠溶胶囊的药理学及毒理学分析

一、抗肿瘤作用

    1、对小鼠移植性肉瘤180(S-180)实体型的影响
    昆明小鼠60只,雌雄各半,体重18~22g,每只小鼠右腋窝皮下接种1:4S-180细胞悬液0.2ml,次日随机分成6组,每组10只。对照组灌胃等体积的生理盐水;华蟾素片组灌胃给药6g药材/kg;生命金春肠溶组分别灌胃给药1.5、3、6g药材/kg;环磷酰胺为阳性对照组。隔日皮下注射环磷酰胺0.03g/kg。连续灌胃给药14天,每天一次。给药结束后次日,处死小鼠,剥取瘤块,称重,计算其肿瘤抑制率。见表1

                     
    结果:生命金春肠溶肠溶组、华蟾素片组和环磷酰胺组对小鼠移植性肉瘤180实体型生长有明显的抑制作用,与对照组相比有极显著性差异。生命金春肠溶组比华蟾素片组对小鼠移植性肉瘤180实体型生长抑制作用强,抗肿瘤作用增强。


    2、对小鼠移植性肝癌(Hep)实体型的影响
    昆明小鼠60只,雌雄各半,体重18~22g,每只小鼠右腋窝皮下接种1:4Hep细胞悬液0.2ml,次日随机分成6组,每组10只。对照组灌胃等体积的生理盐水;华蟾素片组灌胃给药6g药材/kg;生命金春肠溶组分别灌胃给药1.5、3、6g药材/kg;环磷酰胺为阳性对照组。隔日皮下注射环磷酰胺0.03g/kg。连续灌胃给药14天,每天一次。给药结束后次日,处死小鼠,剥取瘤块,称重,计算其肿瘤抑制率。见表2

    结果:华蟾素肠溶组、华蟾素片组和环磷酰胺组对小鼠移植性肝癌实体型生长有明显的抑制作用,与对照组相比有极显著性差异。华蟾素肠溶组比华蟾素片组对小鼠移植性肝癌实体型生长抑制作用强,抗肿瘤作用增强。

    二、对免疫机能的影响

     1、对单核细胞吞噬功能的影响
     昆明小鼠50只,体重18~22g,雌雄各半,随机分成5组,每组10只。对照组灌胃给同体积的生理盐水;华蟾素片组灌胃给药6g药材/kg;生命金春肠溶组分别灌胃给药1.5、3、6g药材/kg。连续灌胃给药7d,每天一次,末次给药后1h,于小鼠尾静脉注射印度墨汁0.1ml/只(用生理盐水稀释6倍),在注射后2min、20min,分别与眼眶静脉取血20ml,加入4ml0.1%碳酸钠液中,752型分光光度计680nm处比色。然后称取小鼠体重,处死小鼠,称取小鼠肝、脾重量,计算吞噬指数。见表3
 
    结果:华生命金春肠溶组和华蟾素片组对单核细胞的吞噬功能具有明显的增强作用,与对照组相比有极显著性差异。生命金春肠溶组比华蟾素片组对单核细胞的吞噬功能明显增强。

    2、对溶血素生成的影响
    昆明小鼠60只,雌雄各半,体重18~22g,随机分成5组,每组12只。对照组灌胃等体积的生理盐水;华蟾素片组灌胃给药6g药材/kg;华蟾素肠溶组分别灌胃给药1.5、3、6g药材/kg。连续给药7d,每天一次,于给药第一天每鼠腹腔注射5%鸡红细胞混悬液0.2ml进行免疫。免疫后第7d,末次给药后1h,摘眼球取血,离心,取血清用生理盐水稀释100倍。取血清1ml与5%鸡红细胞混悬液0.5ml混合,在0℃冰箱中加10%补体0.5ml,在37℃恒温箱中保温30min,在0℃冰箱中终止反应,离心,取上清夜1ml与3ml都氏试剂反应,于752型分光光度计560nm处比色,测吸光度。计算出溶血素含量。见表4
    结果:生命金春肠溶组和华蟾素片组具有显著增加溶血素含量的作用,与对照组相比有极显著性差异。华蟾素肠溶组比华蟾素片组增加溶血素含量的作用强。

    三、抗乙型肝炎的作用

    1、对四氯化碳引起的肝功能的损伤的影响
    SD系大白鼠60只,雌雄各半,体重150~180g,随机分成6组,每组10只。空白对照组与四氯化碳中毒对照组灌胃等体积的生理盐水;华蟾素片组灌胃给药3.2g药材/kg;生命金春肠溶组分别灌胃给药0.8、1.6、3.2g药材/kg。连续给药10d,每天一次,第10d灌胃15%四氯化碳麻油液0.2ml/100mg(空白对照除外)。24h后处死小鼠,取血离心,取血清按赖氏法测定血清谷丙转氨酸(SGPT)与谷草转氨酶(SGOT)的活性。见表5
结果:生命金春肠溶组和华蟾素片组能明显抑制四氯化碳引起大鼠血清SGPT和SGOT的升高,对肝损伤具有明显保护的作用,与对照组相比有极显著性差异。生命金春肠溶组比华蟾素片组对四氯化碳引起大鼠血清SGPT和SGOT升高抑制作用增强,对肝损伤保护作用增强。

    2、促进胆汁分泌的作用
    SD系大白鼠50只,雌雄各半,体重150~180g,禁食(不禁水)12h,随机分5组,每组10只。对照组给等体积的生理盐水;华蟾素片组给药3.2g药材/kg;华生命金春肠溶组分别给药0.8、1.6、3.2g药材/kg。3%戊巴比妥30mg/kg腹腔注射麻醉下剖腹,在左右肝管插入一内径2mm塑料软管以收集胆汁,在近幽门处剪开胃前壁,向十二指肠内插入一内径2mm软管以备给药。待胆汁流量稳定后进行实验,观察给药前后30min胆汁的流量。见表6

    结果:生命金春肠溶组和华蟾素片组可明显增加胆汁的分泌,与对照组相比有极显著性差异。生命金春肠溶胶囊比华蟾素片组促进胆汁分泌作用增强。

    3、对鸭乙型肝炎动物模型的药物抑制试验
    采用垂直传播感染鸭乙型肝炎病毒( DHBV ),DHBV—DNA 检测阳性麻鸭,分设6组,各组均为12只随机选择的十二月龄麻鸭,华蟾素片组给药4g药材/kg;生命金春肠溶组分别给药1、2、4g药材/kg;阳性对照组(无环鸟苷 0.4g/kg),口服给药,每周3次,隔日给药,连续12周;阴性对照组口服乳酶生片剂,1片/次,连续12周。以上各组麻鸭分别在给药前、给药后的第4周、第8周、第12周和停药后第2周静脉采血,作血清的DHBV一DNA 斑点杂交试验。见表7

    结果:生命金春肠溶组和华蟾素片组对麻鸭血清DHBV—DNA的含量有不同程度的降低,能抑制DHBV—DNA的复制,在给药前后有显著性差异,具有抗乙肝病毒的作用,在用药12周时,生命金春肠溶组转阴率分别为66.7%、58.3%、50%;华蟾素片组转阴率为50%。生命金春肠溶组比华蟾素片组抗乙肝病毒的作用强。

    长期毒性实验,对大白鼠进行了低、中、高三个剂量分别为8、16、32g/kg /d,相当于临床拟用量的19.0、38.1、76.2倍,周期为12周的长期毒性试验,给药后逐日观察动物的一般状况,每周称体重一次,于给药12周后,各组均处死12只大白鼠,另外剩余大白鼠停药恢复2周后处死。给药12周后,生命金春肠溶胶囊对动物的一般状况,血液学、血液生化学、心电图均无明显的影响,系统解剖、脏器系数及组织病理学检查也未发现异常病理改变。停药2周也未见明显改变。故在大白鼠12周的周期长期毒性试验中,未发现明显毒性反应和延迟毒性反应。可见,32g/kg /d以下大鼠口服给药是安全的剂量。

    急性毒性实验结果表明,将生命金春肠溶胶囊最大浓度、最大容积灌胃给药,在24h内连续给药3次,每次间隔3h,累积药物总量达125g/kg,相当于临床拟用量的298倍。对照组及华蟾素肠溶胶囊组给药后小鼠活动正常,动物皮毛光泽,口鼻无分泌物,无腹泻发生。无1只小鼠死亡。给药7d后称体重,第8d处死后解剖每只小鼠肉眼观察心、肝、脾、肺、肾、脑、胸腺、肾上腺、卵巢、子宫、胃、肠等均未发现颜色及形态异常。表明本胶囊无急性毒性反应。

    结论:生命金春肠溶组和华蟾素片组对小鼠移植性肉瘤180实体型生长和小鼠移植性肝癌实体型生长有明显的抑制作用;对单核细胞的吞噬功能具有明显的增强作用;具有显著增加溶血素含量的作用;明显抑制四氯化碳引起大鼠血清SGPT和SGOT的升高,对肝损伤具有明显保护的作用;可明显增加胆汁的分泌;对麻鸭血清DHBV—DNA的含量有不同程度的降低,能抑制DHBV—DNA的复制,具有抗乙肝病毒的作用。可见,生命金春肠溶胶囊比华蟾素片抗肿瘤,提高机体的免疫力,抗乙型肝炎等药理作用强。

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